C18液相色譜柱的操作步驟,簡單易懂!
C18液相色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲(封頭)與柱填料等組成。柱管多用不銹鋼制成,若果使用時柱壓不高于70kg/cm2時,也可采用厚壁玻璃或石英管,管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。用于柱填料的裝填。壓帽即色譜柱兩端套合于柱管端外壁的塑性圓柱帽,中部有小孔,多為聚四氟乙烯制成,用于固定篩板。密封環(huán)位于接頭螺旋環(huán)內(nèi)壁的彈性環(huán),多為聚四氟乙烯制成,用于色譜柱兩端壓帽與柱外壁的密封。篩板位于色譜柱兩端緊貼柱管端的篩網(wǎng)狀薄片,由燒結(jié)不銹鋼或鈦合金制成,孔徑取決于填料粒度,一般為0.2~20&um(5~10&um)。用于防止填料從柱管內(nèi)漏出。接頭柱兩端連接流動相與柱管的中空環(huán)套,由不銹鋼制成。用于柱管路聯(lián)通與柱端高壓固定。封頭柱兩端的密封螺絲,用于保存色譜柱時封頭。柱填料裝填于柱管內(nèi)的固定相擔體,其直接決定了色譜柱的類型與用途,是色譜柱的核心。多為無定形或球形硅膠基質(zhì),也有環(huán)糊精、活性炭、聚苯乙烯-二乙烯基苯、聚甲基丙酸酯、氧化鋁等基質(zhì)。用于色譜分離。
操作步驟:
1、打開電腦;
2、打開主機、預(yù)熱;
3、進入儀器工作站,聯(lián)機并設(shè)定C18液相色譜柱的參數(shù);
4、啟動泵的動力系統(tǒng)預(yù)處理(排氣等);
5、檢查是否漏夜、柱壓是否正常;
6、設(shè)置儀器方法,包括儀器的使用條件等;
7、激活操作方法,等待儀器平衡、基線平直;
8、儀器出現(xiàn)“Ready”后可進行樣品分析;
9、操作測試結(jié)束后,清理所有實驗材料,做好清潔衛(wèi)生;
10、記錄儀器使用日志,并與C18液相色譜柱管理員辦理交接手續(xù)。